Ir daudz veidu, kā izmērīt baktēriju augšanu, un viens veids ir sarežģītāks nekā otrs. Lai gan dažreiz mērījumu konsekvence ir jāignorē, pietiek ar vienkāršāko veidu, lai precīzi izmērītu baktēriju augšanu, tāpēc to bieži izmanto. Visbiežāk izmantotās metodes ir baktēriju uzraudzība un skaitīšana, sausas vai mitras masas mērīšana un duļķainības/duļķainības līmeņa mērīšana. Jūsu skolas laboratorijā jābūt instrumentiem un aprīkojumam, kas nepieciešams, lai veiktu vismaz vienu no šiem eksperimentiem.
Solis
1. metode no 3: tieša baktēriju uzraudzība
Solis 1. Sagatavojiet sastāvdaļas
Ir daudz īpašu instrumentu, kas jāsagatavo un var nebūt pieejami bioloģijas laboratorijā. Pirms eksperimenta veikšanas sagatavojiet visu aprīkojumu un konteinerus, lai procesa laikā nebūtu problēmu. Jums nekavējoties jāzina katra izmantotā sastāvdaļa un šī eksperimenta pamatnoteikumi.
- Sagatavojiet skaitīšanas kameru. Tam ir iebūvēta kamera, mikroskopa stikls un mikroskops, tāpēc to ir viegli uzstādīt un lietot. Jūs to varat iegādāties laboratorijas vai skolas preču veikalā. Šim rīkam vajadzētu būt instrukcijām, kas palīdzēs jums veikt visu procesu.
- Sagatavojiet ielejamā krūzīti vai izkliedējamo krūzīti. Abi šie konteineri ļauj jums uzraudzīt baktērijas iekšpusē.
- Kultūra ir termins, ko izmanto, lai aprakstītu organismu augšanu eksperimentā.
- Buljons ir šķidra barotne, kurā kultūra aug.
2. solis. Izmantojiet ieliešanas plāksnes vai izkliedēšanas plāksnes metodi
Jūs varat arī ievietot baktērijas tieši uz trauka, lai tās apskatītu, izmantojot mikroskopu. Ielejiet kultūru uz apakštase un novietojiet to zem mikroskopa. Pārraugiet esošo baktēriju šūnu skaitu.
3. solis. Pārliecinieties, vai koncentrācijas deva ir pareiza
Ja to ir pārāk daudz, baktērijas sakrājas viena pie otras, un jūs varat nepareizi aprēķināt. Atšķaidiet kultūru, sajaucot vairāk buljona. Ja to ir par maz, aprēķina rezultāti nebūs precīzi. Izkāš buljonu, izmantojot filtrēšanas sistēmu.
4. solis. Skaitiet baktērijas
Pēdējais solis ir saskaitīt baktērijas pa vienam. Paskatieties caur palielināmo lēcu skaitīšanas kamerā un pierakstiet redzamo baktēriju skaitu. Salīdziniet rezultātus ar citu testu rezultātiem.
2. metode no 3: sausas un mitras masas mērīšana
1. solis. Pārliecinieties, vai jums ir pareizais aprīkojums
Šī metode izmanto dārgu aprīkojumu un daudz laika. Ja jūsu laboratorijā nav nepieciešamā aprīkojuma, ieteicams izmantot citu metodi. Tomēr, ja jūsu laboratorija ir pietiekami labi aprīkota, mēs iesakām šo metodi, jo tā nodrošina konsekventākus rezultātus. Šajā metodē jums būs nepieciešams:
- Hidrauliskā gravitācijas konvekcijas krāsns
- Svars no alumīnija
- Kolbu komplekts (laboratorijas pudeles)
- Centrbēdzes mašīna (centrifūga) vai laboratorijas filtrēšanas sistēma
2. solis. Pārliecinieties, vai kultūra ir kolbā
Pievienojiet kultūru ķirbim. Šajā posmā kultūrai vajadzētu būt buljonam, lai gan vēlāk tā atkal tiks atdalīta.
Solis 3. Laboratorijas krāsnī nosusiniet alumīnija svēršanas trauku
Tā vietā varat izmantot celulozes acetāta filtra membrānu ar diametru 47 mm un poru izmēru 0,45 µm. Neatkarīgi no izmantotā svēršanas konteinera nosveriet to, jo tas būs jāatskaita vēlāk, nosverot baktēriju šūnas.
4. solis. Maisiet kultūru kolbā, līdz tā ir vienmērīgi sajaukta
Šūna gravitācijas ietekmē dabiski nogrims, un tā būs jāmaisa, lai vienmērīgi izkliedētos kolbā. Tādā veidā jūs varat iegūt vairāk paraugu.
5. solis. Izmantojiet centrifūgu, lai atdalītu baktēriju šūnas no buljona
Šis instruments rotē kolbu un ātri līdzsvarojas tā, lai tas iztukšotu buljonu un atstātu kultūru kolbā.
6. solis. Noberiet pastas uz ķirbja un ievietojiet to svēršanas traukā
Izmetiet buljonu, jo tas jums vairs nav vajadzīgs. Tomēr pagaidām neatbrīvojieties no ķirbja, jo tas joprojām tiks izmantots.
7. solis. Noskalojiet centrbēdzes mašīnu un ielejiet skalojamo ūdeni traukā
Piliniet skalošanas ūdeni kolbā uz baktēriju šūnām, lai iegūtu mitru svaru.
8. solis. Atrodiet sauso svaru
Lai izmērītu sauso svaru, ievietojiet trauku cepeškrāsnī un žāvējiet 100ºC temperatūrā 6–24 stundas saskaņā ar krāsns un/vai izmantotā svēršanas trauka norādījumiem. Pārliecinieties, ka temperatūra nav pārāk augsta, lai baktērijas nedegtu. Kad esat pabeidzis, nosveriet baktērijas un neaizmirstiet rezultātu samazināt par svēršanas trauka svaru.
3. metode no 3: duļķainības mērīšana
Solis 1. Sagatavojiet nepieciešamo aprīkojumu
Jums būs nepieciešams gaismas avots un spektrofotometrs. Abus var iegādāties laboratorijas preču veikalos. Spektrofotometram jābūt instrukcijām, kas palīdzēs jums izmantot instrumentu atbilstoši jūsu modelim. Spektrofotometra cena ir diezgan pieņemama un viegli lietojama, tāpēc tā var kļūt par vienu no visbiežāk izmantotajām metodēm baktēriju augšanas mērīšanai.
2. solis. Izgaismojiet paraugu
Saskaņā ar Laima terminu duļķainība ir parauga duļķainības līmenis. Jums jāiegūst duļķainības mērījuma numurs, kas tiek mērīts NTU (nefelometriskā duļķainības vienība). Šis rīks ir jākalibrē, pirms tas var precīzi izmērīt paraugu.
Solis 3. Ierakstiet rezultātus
Duļķainību ietekmē baktēriju skaits paraugā. Spektrofotometrs arī pateiks pārraides procentuālo daudzumu (%T). Samazinoties duļķainībai, šis skaitlis palielināsies. Salīdziniet rezultātus ar citu testu rezultātiem, lai izmērītu baktēriju augšanu.
Brīdinājums
- Tā kā jums ir darīšana ar baktēriju koloniju, ievērojiet piesardzības pasākumus, valkājot drošības aprīkojumu, piemēram, aizsargbrilles un cimdus. Ir arī laba ideja valkāt masku, it īpaši, ja jūs nezināt, kāda veida baktērijas tiek pētītas.
- Veiciet piesardzības pasākumus, pirms rīkojaties ar jebkura veida baktērijām, pat nekaitīgām. Pirms darba uzsākšanas pārliecinieties, ka visas atvērtās brūces uz ķermeņa ir pilnībā pārklātas.
